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HPLC分析中,樣品需要衍生化處理的目的在于將不適用于液相色譜分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橐子诜治龅难苌?,通過改善化合物的物理化學性能從而改變其選擇性,提高待分析物的檢測靈敏度,常用的方法是給不能被檢測物質(zhì)的結(jié)構(gòu)中加入發(fā)色團,使其能夠被檢測。柱前衍生是目前應用廣泛的衍生技術(shù)。柱前衍生是指待測物在液相色譜分離前就完成衍生化,再根據(jù)衍生物的性質(zhì)進行色譜分離檢測,若衍生過程所用的試劑若能穩(wěn)定存在,且衍生反應條件成熟可靠時,其優(yōu)勢體現(xiàn)在對設備要求不高,可以人工衍生,且衍生后的副產(chǎn)物可以經(jīng)過預處...
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一、光化學衍生器的解析:1、光化學衍生方法是基于待測物質(zhì)在特殊的光化學反應體系吸收紫外光輻射從而引起物質(zhì)的性質(zhì)或者結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,形成熒光增強的現(xiàn)象,使得待測物的熒光性質(zhì)發(fā)生改變來提高熒光分析的靈敏度的一種方法。2、廣泛應用于液相色譜檢測分析,使用時置于色譜柱和檢測器之間,進行柱后連續(xù)光化學衍生反應提高熒光、紫外、電化學檢測和化學發(fā)光檢測器的靈敏度和響應的選擇性。二、光化學衍生器的優(yōu)勢:1、安裝簡單,靈敏度高。2、使用時置于色譜柱和檢測器之間,進行柱后連續(xù)光化學衍生反應。采取液...
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氨基酸分析儀,是指用于測定蛋白質(zhì)、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的方法。進行氨基酸分析前,必須將蛋白質(zhì)及肽水解成單個氨基酸。它是基于陽離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測定的離子交換色譜儀。氨基酸分析儀由色譜柱、自動進樣器、檢測器、數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)組成。通常細分為兩種系統(tǒng):蛋白水解分析系統(tǒng)(鈉鹽系統(tǒng))和游離氨基酸分析系統(tǒng)(鋰鹽系統(tǒng)),利用不同濃度和pH值的檸檬酸鈉或檸檬酸鋰進行梯度洗脫。其中鈉鹽系統(tǒng)一次多分析約25種氨基酸,速度較快,基線平直度好;鋰鹽系統(tǒng)一次多分析...
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一、氨基酸分析儀的組成及原理:1、氨基酸分析儀是指用于測定蛋白質(zhì)、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的方法。進行氨基酸分析前,必須將蛋白質(zhì)及肽水解成單個氨基酸。2、它是基于陽離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測定的離子交換色譜儀。由色譜柱、自動進樣器、檢測器、數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)組成。3、基本原理為流動相(緩沖溶液)推動氨基酸混合物流經(jīng)裝有陽離子交換樹脂的色譜柱,各氨基酸與樹脂中的交換基團進行離子交換,當用不同的pH緩沖溶液進行洗脫時因交換能力的不同而將氨基酸混合物分離,4...
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凝膠凈化的分離原理:一個含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時,各分子在柱內(nèi)同時進行著兩種不同的運動:垂直向下的移動和無定向的擴散運動。大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相內(nèi),在向下移動的過程中,從一個凝膠內(nèi)擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大的先流出...
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